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人嗜酸性粒细胞表达功能性CCR7。( Human eosinophils express functional CCR7. )
P Akuthota S Ueki J Estanislau PF Weller basic immunology chemokines eosinophils
人嗜酸性粒细胞对一系列可溶性趋化因子具有定向趋化活性。在过敏性炎症的实验模型中,已观察到嗜酸性粒细胞迁移至引流淋巴结,但尚不清楚嗜酸性粒细胞是否表达CCR7(一种协调白细胞向淋巴结转运的关键趋化因子受体)。本研究的目的是证明人嗜酸性粒细胞对CCR7的表达以及对CCR7的已知配体CCL19和CCL21的功能反应。从健康供体中通过阴性选择纯化人嗜酸性粒细胞。通过流式细胞术和Western blot检测新鲜纯化的、未刺激的嗜酸性粒细胞和IL-5引物的嗜酸性粒细胞的CCR7表达。transwell法测定对CCL19和CCL21的趋化性。用流式细胞术和显微镜观察CCL19和CCL21的形态变化。流式细胞术记录趋化因子刺激后fluo-4 AM负载的嗜酸性粒细胞的钙通量。用Western blot和Luminex法检测CCl19和CCl21刺激的嗜酸性粒细胞ERK磷酸化水平。流式细胞术和Western印迹显示人嗜酸性粒细胞表达CCR7。嗜酸性粒细胞显示可检测到CCR7的细胞表面表达。IL-5诱导的嗜酸性粒细胞对CCL19和CCL21具有一定的趋化作用。在CCL19或CCL21刺激下,IL-5诱导的嗜酸性粒细胞随F-肌动蛋白极化而呈剂量依赖性改变,并出现钙内流。最后,CCL19或CCL21刺激的嗜酸性粒细胞对两种CCR7配体的反应表现出ERK磷酸化的增强。我们证明人嗜酸性粒细胞表达CCR7,并对CCR7的已知配体有多能反应。
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